二、伊紅Y染色法

　　【準(zhǔn)備】

　　1、用蒸餾水配制4% 伊紅 Y 染液。

　　2、配制0.01mol/L，pH7.4 PBS溶液。

　　【方法】

　　1、取正常新鮮精液（精子濃度宜大于：60×106/mL），用pH 7.4的 PBS洗滌 3次，調(diào)整精子濃度為10×107/mL。

　　2、取精子懸液16μL，移置載玻板的漆孔內(nèi)，分別設(shè)2個(gè)測(cè)定和對(duì)照孔，另取待檢血清20μL，補(bǔ)體血清4μL 加入測(cè)定孔內(nèi)，對(duì)照孔只加待測(cè)血清不加補(bǔ)體，充分混勻。

　　3、把玻板移入濕盒內(nèi)，在37℃孵育30min，每孔加4%伊紅Y 4μL，加上蓋玻片使其作用 2min，進(jìn)行鏡檢。

找出導(dǎo)致精子制動(dòng)和死亡的原因

　　【判斷】

　　由于活精子不著色，死精子著染為紅色，計(jì)算200個(gè)精子中，死精子所占的百分?jǐn)?shù)，減去對(duì)照組死精子的百分?jǐn)?shù)，即為抗體殺滅精子的百分率。以殺滅精子≥10% 以上者為陽(yáng)性。