監(jiān)測卵泡:
為評價卵巢刺激效果與決定取卵時間,須利用陰道B超來監(jiān)測卵泡大小,并配合抽血檢查E2值 (雌激素),調(diào)整用藥量。當二至三個以上的卵泡直徑大于1.8cm,且1.4cm以上的卵泡數(shù)與E2值相當,便可注射人絨毛促性腺激素(hCG),促使卵泡成熟。在注射hCG后34~36小時取卵。
取卵:
最常用的取卵方式是在的局部麻醉下,經(jīng)陰道B超引導,將取卵針穿過陰道穹窿,直達卵巢吸取卵子,并立即在顯微鏡下將卵子移到含胚胎培養(yǎng)液的培養(yǎng)皿中,置37°C的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
取精:
精子取出的時間與取卵的日子為同一天。取精前洗凈雙手,用自慰法留取精液。所給的小杯是無菌的,留取時不要觸摸杯緣及杯內(nèi)。取出的精液采用上游法或Percoll密度梯度離心法處理。
體外受精:
取卵后4~5小時將處理后的精子與卵子放在同一個培養(yǎng)皿中,共同培養(yǎng)18小時后,可在顯微鏡下觀察受精情況。若精子質(zhì)量太差,無法自然受精,則必須以顯微注射法強迫受精 (參考卵細胞漿內(nèi)單精子顯微授精)。
胚胎移植:
受精卵在體外培養(yǎng)48~72小時可發(fā)育到8~16細胞期胚胎。此時依據(jù)患者的年齡、曾經(jīng)懷孕與否及胚胎的質(zhì)量,決定移植胚胎的數(shù)目,多余的胚胎可冷凍保存。胚胎移植一般不需麻醉。目前多在受精后2~3天移植胚胎,我所采用的是受精后3~5天胚胎移植。推遲胚胎移植的時間,對體外培養(yǎng)的條件要求就越高,但推遲移植時間更符合妊娠生理,同時也可通過自然篩選淘汰劣質(zhì)胚胎,可提高妊娠率,降低多胎率。
胚胎移植后補充激素:
目前我們多采用注射法給予黃體酮支持黃體。如果確定妊娠,則改用hCG繼續(xù)補充到懷孕10周。
胚胎移植后14天,可由驗尿或抽血確定是否妊娠。