必須從懷孕前一個月開始服用。強調懷孕前就要開始服用的目的是為使婦女體內的葉酸維持在一定的水平，以保證胚胎早期有一個較好的葉酸營養狀態。據研究，婦女在服用葉酸后要經過 4 周的時間，體內葉酸缺乏的狀態才能得以糾正。這樣在懷孕早期胎兒神經管形成的敏感期中，足夠的葉酸才能滿足神經系統發育的需要，而且要在懷孕后的前三個月敏感期中堅持服用才能起到最好的預防效果。

美國營養學家推薦孕婦每天吃一只香蕉，因為香蕉中富含葉酸 、維生素 B6 及鉀、鎂等物質。必要時每天服用400 微克葉酸，一直到妊娠開始3個月。美國加州研究所人員發現，若在婦女孕前和懷孕開始 1、2 個月期間每天補充 400 微克葉酸，可使胎兒兔唇和腭裂缺陷的發生率降低 25 ％ ―50 ％。 我國學者發現婦女懷孕早期體內葉酸缺乏是兒童先天性心臟病發生的原因之一，若母親孕前早期3 個月內每天補充 400 微克葉酸，可能減少 35.5 ％的先天性心臟病發生。

葉酸補充的最佳時間：以懷孕為為臨界點，孕前補三個月，孕后補三個月。當然有網友提出疑問：萬一吃了三個月還是沒有懷孕呢？醫生表示，葉酸是維生素B族，平時很多食物中也含有葉酸，多吃不會對人造成損害。